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      FISH探針技術作為非放射性檢查系統,有著顯著優勢

      發布時間:2022-01-22      點擊次數:355
         FISH探針的基本原理是用特殊的核苷酸分子標記DNA(或RNA)探針,使探針直接與染色體或DNA纖維切片雜交,使與熒光素分子偶聯的單克隆抗體與探針分子特異性結合,從而實現染色體或DNA纖維切片
        FISH探針具有安全、快速、靈敏度高、探頭長期保存、可同時顯示多種顏色等優點,不僅可顯示中期分裂相,還可顯示間期核。
        FISH探針技術作為非放射性檢查系統,具有以下優勢:
        1、熒光試劑和探針經濟、安全;
        2、探頭穩定,標記一次后,2年內即可使用;
        3、實驗周期短,快速獲得結果,特異性好,定位準確;
        4、FISH可定位長1kb的DNA序列,其靈敏度與放射性探針相當;
        5、多色FISH在同一個核上顯示不同的顏色可以同時檢測多個序列;
        6、載玻片可以顯示中期染色體數目和結構的變化,混懸液中也可以顯示間隔性染色體DNA的結構。FISH使用的探針序列來源于基因組或細菌人工染色體(BAC)DNA,包含許多重復序列。一系列重復序列,例如著絲粒中存在的衛星DNA;分散在類似于Alu家族的迭代序列中。
        探針中的這些重復序列在與基因組雜交時容易產生非特異性信號,成為探針制備過程中的難題。人Cot-1DNA是雜交中常用的關閉和清除重復序列的工具之一。制備探針前,可用人Cot-1DNA篩選重復序列,得到特異性模板制備探針。然而,由于人Cot-1DNA只包含目標片段中部分重復序列,用Cot-1DNA去除特異性信號并不有效。
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